標準作業手順書 雛形 · SOP-04

呼気凝縮液(EBC)の採取と保存

採取条件を明示し研究内で一定に保つことで、施設内および施設間で比較できる試料を得ること。

このページは雛形の本文です。Word 形式 でも配布しています。[ ]は自施設で決める項目です。数値は公表されている論文・学会文書の本文で確認できたものだけを引用し、出典を併記しています。出典によって値が一致していない項目は、その旨を本文に明記しました。ライセンスは CC BY 4.0 です。

文書番号SOP-04
適用範囲呼気を冷却して凝縮液を集め、生化学的な測定に供する作業に適用する。
目的採取条件を明示し研究内で一定に保つことで、施設内および施設間で比較できる試料を得ること。
版第1版(2026年11月3日)

1. 被験者の事前条件

  • 絶食:影響が既知の物質を測る場合、測定前少なくとも 8 時間は避ける(欧州呼吸器学会 技術標準 2017)
  • 運動:採取前少なくとも 1 時間は控える(同)
  • 努力性の呼吸機能検査:採取前 10 分以内に行わない(同。ただし合意はないと明記されている)
  • 採取時刻:日内変動があるため研究内で揃える(同)

2. 採取条件

採取温度について、学会文書は単一の推奨値を定めていない。「温度または温度範囲を明示すること」「同一研究内では温度を一定に保ち、正確に報告すること」が求められている(Horváth 2005)。自施設の値を決めて記入すること。

  • 採取温度:[  ]℃(選択肢の例として、塩を加えた氷でおよそ 0 ℃という記載がある)
  • 呼吸様式:安静換気で行い、鼻クリップと唾液捕集器を併用する(同)
  • 採取時間:多くの媒介物質については 10 分間が推奨されている(同)。自施設の設定:[  ]分
  • 得られる量:成人の安静換気 10 分でおよそ 1〜3 mL、4 歳を超える小児の多くで 1〜2 mL(同)
  • 唾液の混入対策:唾液捕集器の使用、凝縮器を口より高い位置に置く、吸口と凝縮器を管で離す、定期的に嚥下させる。唾液アミラーゼの定型的な測定は必要ない(同)

3. 保存

  • 採取後ただちに凍結し、−70 ℃で保存する(Horváth 2005)
  • 凍結融解の反復を避けるため、分析項目ごとに別の管へ分けて保存する(同)
  • 容器の材質について具体的な推奨はないが、一部の容器は窒素酸化物を溶出させる恐れがあると警告されている(同)
  • 自施設の保存温度:[  ]℃、分注数:[  ]本

4. pH 測定を行う場合

  • 二酸化炭素を含まない気体による処理(アルゴンなど)を行うかどうかを決め、実施の有無と手段を記録する(Horváth 2005)
  • 同文書は「脱気」という語は誤称であり「気体標準化」の方が適切としている
  • 処理を行わない場合は、採取から測定までの時間を記載する(同)
  • 流量・時間・気体の純度の数値は、同文書では示されていない。自施設の条件:[  ]

5. 記録する項目

  • 被験者識別番号、採取日時、採取者
  • 採取温度、採取時間、得られた容量
  • 事前条件の遵守状況(絶食、運動、呼吸機能検査からの経過)
  • 気体標準化の有無と条件、採取から測定までの時間
  • 保存温度、分注本数、凍結融解の回数

引用した公表資料

  1. Horváth I, Hunt J, Barnes PJ(ATS/ERS Task Force on Exhaled Breath Condensate). Exhaled breath condensate: methodological recommendations and unresolved questions. European Respiratory Journal 2005;26:523-548. DOI: 10.1183/09031936.05.00029705
  2. Horváth I, et al. A European Respiratory Society technical standard: exhaled biomarkers in lung disease. European Respiratory Journal 2017;49:1600965. DOI: 10.1183/13993003.00965-2016

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